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测定方法取新鲜样品,加入液氮,研磨成粉状,密封,置于-80℃冰箱保存。称0.2g样品于离心管,加适量同位素内标,2mL乙腈水溶液,4℃冰水浴超声30min。离心,取上清液。重复提取一次,合并上清液。依次用甲醇、水、乙腈水溶液活化固相萃取柱,上样,用乙腈水溶液洗脱,收集全部流出液。浓缩,用50%甲醇水溶液复溶,过0.22μm滤膜,待测。部分激素(吲哚-3-乙酸甲酯、茉莉酸甲酯、12-氧代植二烯酸)使用甲酸乙腈溶液提取,方法同上。收集上清液,加适量无水硫酸镁和C18,振荡,离心,取适量上清液浓缩近干,用50%甲醇水溶液复溶,过0.22μm滤膜,待测。标准曲线绘制分别取适量标准标准溶液及内标溶液,用50%甲醇水溶液定容至1mL,配制成目标物质量浓度为:1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL,内标浓度为100ng/mL系列标准溶液。仪器条件100μg/L标准样品多反应监测(SRM)质量色谱图附:结果表示:目标物含量以ng/g表示
发布时间: 2026 - 09 - 09
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发布时间: 2025 - 02 - 13
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木质素酚的来源木质素是土壤有机碳的重要组成部分,具有芳香单元的三维立体结构, 化学稳定性高,未经分离或化学转化,现有的分析技术很难对其进行直接定量分析。分子标志物的方法是目前用于测定土壤木质素含量和组成较为普遍的方法,即用木质素酚类化合物的含量,对木质素的含量及有机质来源进行指示。目前常用的处理方法是碱性氧化铜裂解出小分子单体,通过LC-DAD、LC-MS、GC-FID和GCMS测定。目标物质分类及应用意义香草基酚系列(V):香草酸、香草醛、香草乙酮丁香基酚系列(S):丁香酸、丁香醛、乙酰丁香酮肉桂基酚系列(C):对-香豆酸、阿魏酸对羟基酚系列(P):对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛、对羟基苯乙酮样品处理方法方法原理:土壤样品中木质素通过碱性氧化铜在高温下水解成单环酚盐类,调节pH=1,用液液萃取提取出酚类单体,经双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(BSTFA)衍生,用GCMS分离检测,以保留时间和质谱特征离子定性,内标法定量。操作步骤:称0.5-1.0g(精确至0.0001g)样品于反应釜,加1.0g氧化铜和0.1g硫酸亚铁铵,混匀。加10mL氢氧化钠(2mol/L),氮气置换釜内空气15min,170 ℃ 水解3h,加40ug内标,转移,离心,固液分离,10mL超纯水分两次清洗沉淀,合并上清液。1+1盐酸调pH=1,暗处放置1h,离心,固液分离,0.1molL盐酸清洗沉淀两次,合并上清液。提取液加2g氯化钠,混匀,用30mL乙酸乙酯分3次萃取,收集合并有机相,过无水硫酸钠除水。40 ℃氮吹至干燥,加100uL吡啶和400uLBSTFA,70℃下反应3h,上机测定。校正曲线:取适量木质素酚标准使用液,加入到预先装有1mL乙酸乙酯的衍生瓶中,加40ug内标,配制成系列标准溶液,40 ℃下氮气吹干,衍生。数据计算及分析定性方法:通过样品中目标物与标准系列中目标物的保留时间、质谱图,碎片离子质荷比及其丰度信息比较,对目标物进行定性。保留时间窗口为标准溶液中平均保留时间±3倍标准偏差,样品质谱图和标准系列中间点质谱图中定性离子相对丰度高于30%的,其相对丰度的偏差在±30%之内,小于10%的其偏差在±50%内,可以认为存在目标物。定量方法:内标法:以目标化合物和相对应内标的定量离子峰面积比值为纵坐标,浓度比为横坐标,用最小二乘法建立校准曲线。相关系数r≥0.990数据展示如需完整ppt资料请联系工作人员获取~栢晖生物成立于2014 年,公司致力于为生态、农业、林业等科学研究领域提供专业的检验检测服务。公司拥有成熟、完善的实验室管理体系以及强大的实验技...
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发布时间: 2024 - 12 - 06
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# 栢晖 #—特色检测指标—土壤、植物酶活检测氨基糖、PLFA及其同位素、磷组分木质素酚、CUE、有机氮组分、有机酸氨基酸、微生物量碳氮磷、同位素等苯多羧酸、红外光谱、微生物多样性等其他土壤、植物、水体等常规检测指标均可测定欢迎联系下方相关工作人员详细沟通
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发布时间: 2024 - 11 - 21
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土壤酶活性,是指土壤酶催化物质转化的能力。常以单位时间内单位土壤的催化反应产物量或底物剩余量表示。土壤酶活性既包括已积累于土壤中的酶活性,也包括正在增殖的微生物向土壤释放的酶活性,它主要来源于土壤中的微生物,动物和植物。土壤酶活的分类:已知的酶根据酶促反应的类型可分为六大类。即水解酶、氧化还原酶、转移酶、裂合酶、异构酶和连接酶。1. 水解酶类:酶促各种化合物中分子键的水解和裂解反应。主要包括蔗糖酶、淀粉酶、纤维素酶、脲酶、蛋白酶、磷酸酶等。2.氧化还原酶类:指催化两分子间发生氧化还原作用的酶的总称。主要包括脱氢酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶等。3.转移酶类:指能够催化除氢以外的各种化学官能团从一种底物转移到另一种底物的酶类,包括转氨酶、果聚糖蔗糖酶、转糖苷酶等。4.裂合酶类:指催化由底物除去某个基团而残留双键的反应、或通过逆反应将某个基团加到双键上去的反应的酶的总称,主要包括谷氨酸脱羧酶、天门冬氨酸脱羧酶等。5.异构酶类:酶促有机化合物转化成它的异构体的反应。6.连接酶类:是一种催化两种大型分子以一种新的化学键结合一起的酶。测定方法分析:1.生化培养法作为酶活测定的重要方法之一,其又细分为分光光度法和滴定法。分光光度法:其基本原理是酶与底物混合经培养后产生某种带颜色的生成物,可在某一吸收波长下产生特征性波峰,再用分光光度计测定设定的标准物及生成物的吸光值,由此确定酶活性的含量。滴定法:如果产物之一是自由的酸性物质可用此法。如脂肪酶催化脂肪水解释放出脂肪酸,脂肪酸的含量可以通过滴定进行定量,通过计算反应过程中脂肪酸的增加量就可以计算出脂肪酶的酶活力。2.荧光法荧光法是一种基于荧光信号的酶活测定方法,其原理是通过测量酶促反应中荧光物质的变化来推算酶活性。荧光法具有较高的灵敏度和选择性,适用于低浓度底物或产物的检测。不过,荧光法需要特殊的荧光仪器和荧光标记的底物或产物,通常这些产物需要人工合成,准备起来较复杂,且荧光效率随温度而变化,故在整个测定过程中保持温度恒定十分重要,成本较高且操作相对复杂。荧光法实验操作流程:3.酶联免疫试剂盒检测ELISA试剂盒是一种用于定量或定性检测样品中特异性抗原或抗体的试剂组合。它通常由酶标记抗体、酶底物、终止液、标准品、样品稀释液等组成。通过酶促反应,将抗原-抗体反应的特异性反应转化为可测量的光信号,从而实现对样品中抗原或抗体的定量或定性分析。4.微量法活性检测试剂盒检测微量法和多数生化培养法的测定原理都是朗伯比耳定律: A=kbc,不同的是微量法既可以用可见分光光度计检测,也可以用酶标仪检测;而可见分光光度法只...
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发布时间: 2024 - 11 - 11
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栢晖生物特色检测指标——同位素的测定:更所检测相关讯息so栢晖生物了解更多
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发布时间: 2024 - 09 - 20
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一、试剂药品浓盐酸,氢氧化钠,氯化钡,酚酞二、试剂配制2.1.0.05mol/l盐酸:取4.16ml浓盐酸缓缓加入1000mlUP 水中。2.2.0.1mol/l氢氧化钠:0.4g氢氧化钠用UP水定容至100ml。2.3.酚酞指示剂:称取0.5g酚酞,用95%乙醇溶解定容至100ml。2.4.11mol/l氯化钡溶液:20.82g氯化钡用UP水定容至100ml。三、洗涤方法所有新的玻璃器皿:用洗涤剂清洗干净后,再用自来水洗,再超声,再用UP水冲洗,再放入90度烘箱烘干。四、实验方法4.1 土壤预培养:称取适量土壤样品置于常温下预培养数天,使土壤恢复到常温状态。4.2 密闭培养:将恢复到常温状态的样本,称取10g置于250ml广口具塞瓶中,内置盛有10ml0.1mol/l氢氧化钠溶液的小玻璃瓶,用蒸馏水调节土壤湿度至其最大持水量的60%,22℃恒温培养7天。4.3 测定:培养结束后取出里面盛氢氧化钠的小玻璃瓶,先加入2ml氯化钡溶液,再加入2滴酚酞指示剂,再用0.05mol/l的盐酸滴定至红色消失,记录滴定体积,计算出CO2的释放量,同时做空白对照(空白用水代替)。更多检测相关讯息so栢晖生物了解~
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