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一、试剂药品浓盐酸，氢氧化钠，氯化钡，酚酞二、试剂配制2.1.0.05mol/l盐酸：取4.16ml浓盐酸缓缓加入1000mlUP 水中。2.2.0.1mol/l氢氧化钠：0.4g氢氧化钠用UP水定容至100ml。2.3.酚酞指示剂：称取0.5g酚酞，用95%乙醇溶解定容至100ml。2.4.11mol/l氯化钡溶液：20.82g氯化钡用UP水定容至100ml。三、洗涤方法所有新的玻璃器皿：用洗涤剂清洗干净后，再用自来水洗，再超声，再用UP水冲洗，再放入90度烘箱烘干。四、实验方法4.1 土壤预培养：称取适量土壤样品置于常温下预培养数天，使土壤恢复到常温状态。4.2 密闭培养：将恢复到常温状态的样本，称取10g置于250ml广口具塞瓶中，内置盛有10ml0.1mol/l氢氧化钠溶液的小玻璃瓶，用蒸馏水调节土壤湿度至其最大持水量的60%，5℃恒温培养7天。4.3 测定：培养结束后取出里面盛氢氧化钠的小玻璃瓶，先加入2ml氯化钡溶液，再加入2滴酚酞指示剂，再用0.05mol/l的盐酸滴定至红色消失，记录滴定体积，计算出CO2的释放量，同时做空白对照(空白用水代替）。更多检测相关讯息so栢晖生物了解~

发布时间: 2024 - 09 - 20

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植物超氧化物歧化酶的测定方法介绍（比色法）

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发布时间： 2022 - 02 - 11

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超氧化物歧化酶（SOD）是生物体系中抗氧化酶系的重要组成成员，广泛分布在微生物、植物和动物体内。其是在上个世纪末才被发现，可以说是生物医学研究史上的一项重大成果,于人类生命研究具有极其重要的意义。今天我们就给大家分享一下如何通过比色法测定植物酶活SOD。图片来源于网络一、试剂所有试剂除注明者外，均为分析纯。1.1 磷酸缓冲液：A液：0.2M的KH2PO4溶液分析纯KH2PO4 27.216克，用蒸馏水定容至1000毫升。 B液：0.2M的K2HPO4溶液分析纯K2HPO4•3H2O 45.644克，用蒸馏水定容至1000毫升。或 A液：0.2M的NaH2PO4溶液分析纯NaH2PO4•2H2O 31.21克，用蒸馏水定容至1000毫升。 B液：0.2M的Na2HPO4溶液分析纯Na2HPO4•12H2O 71.64克，用蒸馏水定容至1000毫升。1.2 母液的配制：（1）0.5M 磷酸缓冲液（PH=7.8）：A液21.25ml+B液228.25ml定容至1000ml；（2）130mM Met(甲硫氨酸)：取1.9399克Met 用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至100ml；（3）750μM四氮唑蓝（NBT）：取0.06133gNBT用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至100ml(避光保存)；（4）100μM EDTA-Na2：取0.0372g EDTA-Na2用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至1000ml；（5）20μM FD (核黄素)：0.00753gFD用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至1000ml（现配现用）。 1.3 SOD反应液：磷酸缓冲液（PH=7.8）：Met：NBT：EDTA-Na2：核黄素（FD）：H2O的比例为15：3：3：3：3：2.5，按母液顺序配制。二、主要仪器万分之一分析天平、紫外分光光度计、医用离心机、研钵三、试样的制备取新鲜样本剪碎充分混匀后，装入样本瓶放入4℃冷藏备用。四、分析步骤4.1 酶液的制备：称取鲜样0.5g放入研钵中，加5毫升PH=7.8的磷酸缓冲液，冰浴研磨，匀浆倒入离心管中，冷冻离心20分钟（10000×g），上清液（酶液）倒入试管中，置于0～4℃下保存待用。 4.2 SOD的测定取型号相同的试管，吸取20ul的酶液，加入3ml反应液，4000Lux照光（多用为环形日光灯的光照培养箱）30分钟（尽量做到照光情况一致）4.3 空白与对照的制备同时取四支试管，三支做对照（CK），一支做空白（不加酶液，以缓冲液代替）；空白置暗处，对照（CK）与酶液同至于4000Lux条件下照光3...

土壤速效钾的测定（醋酸铵-火焰光度计法）

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发布时间： 2021 - 12 - 31

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速效钾是土壤中可被植物吸收利用的组分，具有促进植物淀粉和糖分合成、增加油脂和蛋白质含量、增强作物抗逆性等重要作用。今天栢晖小编整理了如何通过醋酸铵—火焰光度计法来测定土壤中的速效钾~一、试剂(1)中性1.0mol/L NH4OAc溶液：称77.09 g NH4OAc溶于近1升水中，用稀HOAc或NH4OH调节至pH7.0,用水定容至1升。(2)K标准溶液：称取0.1907 g KCLmol/L NH4OAc溶液中，完全溶解后用1mol/L NH4OAc溶液定容至1升，即为含100 mg/L K的NH4OAc溶液。用时分别吸取此100mg/L K标准液0，2，5，10，20，40 ml放入100 ml容量瓶中，用1mol/L NH4OAc定容，即得0，2，5，10，20，40 mg/L K标准系列溶液。二、主要仪器1/1000天平、振荡机、火焰光度计、三角瓶（250ml，100ml）、漏斗（60ml）、滤纸、坐标纸、角匙、吸耳球、移液管（50ml）三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后，取待测样品充分混匀后，按四分法缩减至 100g，粉碎，然后全部通过18目孔径筛，装入样品袋备用。四、分析步骤称取风干土样(1mm孔径)5.00 g于150ml三角瓶中，加1mol/L NH4OAc溶液50.0ml(土液比为1：10)，用橡皮塞塞紧，在20—25℃下振荡30分钟用干滤纸过滤，滤液与钾标准系列溶液一起在火焰光度计上进行测定，在方格纸上绘制成曲线，根据待测液的读数值查出相对应的mg/L数，并计算出土壤中速效钾的含量。五、结果计算式中：C—待测液浓度mg/L；m—风干土重；V—加入浸提剂毫升数；

如何通过残重法测定植物中的粗纤维？（附详细方法）

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发布时间： 2021 - 12 - 27

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之前，栢晖生物给大家整理分享过粗脂肪、粗灰分等指标的测定方法，今天咱们来看看如何通过残重法测定植物中的粗纤维。试验流程如下：一、试剂所有试剂除注明者外，均为分析纯。1.1 1.25%硫酸：取相对密度1.84的浓硫酸13.0ml 加水稀释至1L。1.2 1.25%氢氧化钾溶液二、主要仪器万分之一分析天平、电热板、锥形瓶三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后，按四分法缩减至 100g，粉碎，籽粒全部通过20目筛，装入样品瓶备用。四、分析步骤4.1 称取干燥样品1-3.0g，移入500ml锥形瓶中，加入200ml煮沸的1.25%硫酸，加热使其微沸，保持体积恒定，维持30min，期间每隔5min摇动锥形瓶一次，充分混合瓶内物质。4.2 去下锥形瓶后用带有已知质量滤纸的漏斗过滤，并用热蒸馏水冲洗锥形瓶及漏斗，直至滤液用石蕊试纸测定为中性反应为止。4.3 再用200ml煮沸的1.25%氢氧化钾溶液将滤纸上的沉淀物完全洗入原锥形瓶内，将其加热至沸腾再继续30min，操作同4.1。4.4 煮沸后冷却，用原来所用已知质量的滤纸，用蒸馏水冲洗2~3次，再用乙醇和乙醚各洗涤一次。4.5 将滤纸和沉淀在100~105℃的烘箱中烘至恒重并称重。五、结果计算粗纤维含量（%）=（M1/M2）×100%式中：M1--为烘干后残余物的质量，g；M2--为试样的质量，；100--换算因数。来源：栢晖生物整理。

脯氨酸含量的测定（分光光度计）

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发布时间： 2021 - 12 - 07

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一、试剂所有试剂除注明者外，均为分析纯。1.1 磺基水杨酸：0.6克磺基水杨酸，定容至200ml1.2 酸性茚三酮（现配）：3.75克茚三酮+90ml冰醋酸+36ml蒸馏水1.3 甲苯1.4 脯氨酸标准贮备液：在分析天平上精确称取25mg脯氨酸，倒入小烧杯中内，用少量蒸馏水溶解，然后倒入250ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，此标准液中每ml含脯氨酸100ug。二、主要仪器万分之一分析天平、水浴锅、分光光度计三、试样的制备取新鲜样本剪碎充分混匀后，装入样本瓶放入4℃冷藏备用。四、分析步骤4.1 试样溶液准备称取鲜样0.3g，加入5ml磺基水杨酸，加盖，沸水浴10分钟，过滤，吸取滤液2ml，加2ml冰醋酸和3ml酸性茚三酮，沸水浴40分钟，冷却，加入5ml甲苯，充分振荡，静止分层，取上层甲苯溶液于比色皿中，520nm下比色。4.2 空白溶液制备除不加试样外，应用的试剂和操作步骤同4.14.3 标准曲线绘制吸取脯氨酸标准溶液,0、0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml和3ml用蒸馏水定容至50ml容量瓶中，摇匀，各瓶中脯氨酸的浓度分别为0、1ug/ml、2ug/ml、3ug/ml、4ug/ml、5ug/ml及6ug/ml的系列标准浓度溶液，取7只试管分别取系列标准浓度的脯氨酸2ml，除不加试样外，其余操作步骤同4.1五、结果计算脯氨酸含量（%）=【C×V/（W×Vt×106）】×100式中：C--为从校准曲线或回归方程求得的2ml测定液中脯氨酸含量，ug/2mlV--为提取液体积，ml；W--为称取试样鲜重的质量，g；Vt--为测量液体积，ml；106、100--为换算因数。

植物激素的测定（高效液相色谱法）

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发布时间： 2021 - 12 - 02

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植物激素是植物细胞接受特定环境信号诱导产生的、低浓度时可调节植物生理反应的活性物质。在细胞分裂与伸长、组织与器官分化、开花与结实、成熟与衰老、休眠与萌发以及离体组织培养等方面，分别或相互协调地调控植物的生长发育与分化。今天便给大家整理了如何通过高效液相色谱法测定植物激素的流程，具体如下：一、实验原理本实验以异丙醇/水/盐酸提取方法提取样品中植物内源激素，以安捷伦1290高效液相色谱仪串联AB公司Qtrap6500质谱仪测定植物内源激素IAA、ABA、IBA、GA1/3/4/7、Z、TZR、IP、IPA、SA、MESA、MEJA、JA。本实验采用异丙醇/水/盐酸溶液的方法，通过提取液加酸提高激素在有机溶剂中溶解性并钝化组织中的部分酶。而后通过二氯甲烷萃取并以氮气吹扫方式浓缩样品，该方法流程相对简单，待测物损失较小，同时由于Qtrap6500仪器的灵敏性，不需过多繁琐的净化步骤即可准确检测大部分痕量待测物。二、试剂2.1异丙醇／盐酸提取缓冲液2.2二氯甲烷2.3 甲醇2.4 0.1%甲酸三、主要仪器台式高速离心机（德国SORVAL公司）AR5120电子天平（美国AHOΜS公司）Aglient1290高效液相色谱仪（美国aglient公司）SCIEX-6500Qtrap(MSMS)（美国AB公司）UYC-200全温培养摇床（上海新苗医疗器械制造公司）氮吹仪（杭州米欧仪器有限公司）四、试样的制备取新鲜样本剪碎充分混匀后，装入样本瓶放入4℃冷藏备用。五、分析步骤5.1激素提取（1）准确称量约1 g新鲜植物样品，于液氮中研磨至粉碎；（2）向粉末中加入10 ml异丙醇／盐酸提取缓冲液，4℃振荡30 min；（3）加入20 ml二氯甲烷，4℃震荡30 min；（4）4℃，13000 r/min离心5 min，取下层有机相；（5）避光，以氮气吹干有机相，以400 µl甲醇（0.1%甲酸）溶解；（6）过0.22 µm滤膜，进HPLC-MS/MS检测。5.2 液质检测（1）标准溶液配制以甲醇（0.1%甲酸）为溶剂配制梯度为0.1 ng/ml，0.2 ng/ml，0.5 ng/ml， 2 ng/ml，5 ng/ml， 20 ng/ml，50 ng/ml，200 ng/ml的IAA、IBA、ABA、GA1/3/4/7、Z、 TZR、IP、IPA、JA、MEJA、SA、MESA标准溶液。每个浓度做2个重复，在实际绘制标曲方程时去掉线性不好的点。（2）液相条件色谱柱：poroshell 120 SB-C18反相色谱柱(2.1×150,2.7 μm)；柱温：30℃...

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