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木质素酚的来源木质素是土壤有机碳的重要组成部分,具有芳香单元的三维立体结构, 化学稳定性高，未经分离或化学转化，现有的分析技术很难对其进行直接定量分析。分子标志物的方法是目前用于测定土壤木质素含量和组成较为普遍的方法，即用木质素酚类化合物的含量，对木质素的含量及有机质来源进行指示。目前常用的处理方法是碱性氧化铜裂解出小分子单体，通过LC-DAD、LC-MS、GC-FID和GCMS测定。目标物质分类及应用意义香草基酚系列（V）：香草酸、香草醛、香草乙酮丁香基酚系列（S）：丁香酸、丁香醛、乙酰丁香酮肉桂基酚系列（C）：对-香豆酸、阿魏酸对羟基酚系列（P）：对羟基苯甲酸、对羟基苯甲醛、对羟基苯乙酮样品处理方法方法原理：土壤样品中木质素通过碱性氧化铜在高温下水解成单环酚盐类，调节pH=1，用液液萃取提取出酚类单体，经双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺（BSTFA）衍生，用GCMS分离检测，以保留时间和质谱特征离子定性，内标法定量。操作步骤：称0.5-1.0g(精确至0.0001g)样品于反应釜，加1.0g氧化铜和0.1g硫酸亚铁铵，混匀。加10mL氢氧化钠（2mol/L)，氮气置换釜内空气15min，170 ℃ 水解3h，加40ug内标，转移，离心，固液分离，10mL超纯水分两次清洗沉淀，合并上清液。1+1盐酸调pH=1，暗处放置1h，离心，固液分离，0.1molL盐酸清洗沉淀两次，合并上清液。...

发布时间: 2025 - 02 - 13

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检测方法：游离氧化铝的测定

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发布时间： 2022 - 04 - 01

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试剂试剂1 连二亚硫酸钠试剂2 柠檬酸钠溶液（0.3M）：称取104.4克五水合柠檬酸钠（分析纯）溶于水稀释至1升试剂3 重碳酸钠溶液（1M）：称取84克碳酸氢钠（分析纯）溶于水稀释至1升试剂4 氯化钠溶液（1M）：称取58.45克氯化钠（分析纯）溶于水稀释至1升试剂5 铝标准溶液（500 mg·L-1）称取金属铝片（刮去表面氧化物）0.5000克，加15毫升盐酸（HCl 为1:1）溶解，稀释至1升，在吸取10毫升定溶好的溶液稀释至1升，即浓度为5 mg·L-1，保存于冰箱试剂6 缓冲液pH=4.2 60毫升冰乙酸稀释至900毫升，加入10克氢氧化钠，定溶至1升试剂7 铝试剂：称取0.2000金精二羧酸，用100毫升（试剂6）溶解，用蒸馏水定溶至500 毫升，现配现有，有剩余保存于冰箱，有效期30天试剂8 抗坏血酸还原剂（10 g·L-1）称取1克抗坏血酸溶于100毫升蒸馏水，不能加热，现配现有。制备待测溶液称取0.5-1.0g置于50毫升离心管，加入20mL柠檬酸钠溶液（试剂2）和2.5 mL重碳酸钠溶液（试剂3），在水浴锅内加热至80℃，加入约0.5g连二亚硫酸钠（试剂1），不断搅拌，维持15分钟，冷却后4000 转离心。将清液倒入250mL容量瓶中，重复2-3次，最后离心管中残渣为浅灰色或灰白色，再用氯化钠（试剂4）洗涤离心管中的残渣2-3次，洗涤液一并倒入容量瓶，定溶保存。待测液可用于铝和硅的测定。分析测定在50 毫升比色管中，先加入10毫升（试剂6），2毫升抗坏血酸（试剂8），15毫升蒸馏，再加10毫升（试剂7）混匀，吸取提取液（待测液）5~15毫升于比色管中，混匀定溶，30分钟后，在分光光度计上520 nm比色。铝的标准溶液浓度为0，0.1 mg·L-1、0.2 mg·L-1、0.3 mg· L-1、0.4 mg·L-1、0.5 mg·L-1、5 mg·L-1对应吸取（试剂5）的量为0ml，1ml，2ml，3ml，4ml，5ml定溶到50毫升。结果计算 w（Al2O3）（mg·kg-1）=p×V×ts×1.8895÷m 单位： p——铝的浓度（通过光度计读数再根据标准曲线计算的浓度）m——测定土壤样品质量 ts——分取倍数 1.8895——铝转化成氧化铝的系数

检测方法：土壤阳离子交换量（CEC）的测定

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发布时间： 2022 - 03 - 25

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土壤阳离子交换量是指土壤胶体所能吸附各种阳离子的总量，在农业科研中经常用到，具体测定流程如下：一、试剂（1）乙酸钠溶液(pH8.2) (CH3COONa3H2O)=1 mol /L：称取136g乙酸钠(CH30OONa3H2O，化学醇)用水溶解并稀释至1L。此溶液pH为8.2。否则用稀NaOH溶液或HOAc调节至pH8.2。（2）95%乙醇溶液或99%异丙醇溶液（3）乙酸铵溶液(pH7.0)(CH3COONH4)=1 mol/L。（4）钠标准溶液：称取2.5421g氯化钠(NaCl，分析醇，经105℃烘4 h)，用乙酸铵溶液(试剂3,pH7.0)溶解，定容至1L，即为1000 mg/L准溶液，然后用乙酸铵溶液(试剂3)稀释成不同浓度标准溶液，贮于塑料瓶中。二、主要仪器离心机(转速3000 r/min～4000 r/min)；离心管(50mL)；火焰光度计。三、试样的制备取风干的实验室待测样品充分混匀后，取待测样品充分混匀后，按四分法缩减至 100g，粉碎，然后全部通过60目孔径筛，装入样品袋备用。四．分析步骤称取通过0.25mm筛孔风干土4.00g～6. 00g(粘土4.00g，砂土6.00克)于50mL离心管中，加乙酸钠溶液(试剂1)33 mL，使各管重量一致，塞住管口,振荡5min，离心弃去清液。重复用乙酸钠(试剂1)提取4次。然后以同样方法，用乙醇或异丙醇(试剂2)洗涤样品3次，最后一次尽量除尽洗涤液。将上述土样加入乙酸铵(试剂3)20mL，用玻棒搅成泥浆，振荡5min，离心，将上清液小心倾人50mL容量瓶中，按同样方法用乙酸铵溶液(试剂3)交换洗涤二次。收集的清液最后用乙酸铵溶液(试剂3)定容至50 mL。用火焰光度计侧定溶液中Na+浓度，然后从工作曲线上查得钠的浓度，根据钠的浓度即可计算阳离子交换量。五、结果计算式中：CEC——土壤阳离子交换量，cmol·kg-1(+)；c——从工作曲线上查得Na的浓度，mg·L-1；V——测读液的体积，100 mL；23.0——钠(Na+)离子的摩尔质量，g·mo1-1；103——把mL算成L的除数；m——土样的质量，g。

17种水解氨基酸的测定：高效液相色谱法

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发布时间： 2022 - 03 - 17

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今天，我们通过5个食品样本的分析案例给大家分享一下如何通过高效液相色谱法对17种水解氨基酸进行测定：一、实验方法及原理试样经酸水解得各种氨基酸后,经高效液相色谱在线衍生检测分析外标法定量测定氨基酸酸的含量。二、实验步骤2.1主要实验仪器 HPLC（紫外检测器，在线衍生）离心机（12000rpm）天平（0.01g，0.1mg）超声波清洗机（240w）干式氮吹仪（100℃）烘箱（105℃，115℃）2.2 实验步骤1、水解：准确称取一定量试样（精确至0.0001g），使试样中蛋白质含量在10mg~20mg范围内。将称量好的样品置于水解管中。根据试样的蛋白质含量，在水解管内加10mL~15mL6M盐酸溶液。用氮气置换管内空气后密封。2、水解管在115±5℃烘箱中水解22~24h后放至室温，取出水解液，用0.22μm孔径的滤膜过滤，取1ml续滤液至进样小瓶中，100℃氮吹干后用0.1M的HCL水溶液超声溶解固体物质，取溶液直接进样。（根据实际浓度可以用0.1M的HCL水溶液适当稀释，一般植物均可用1mL 0.1M HCL水溶液稀释）3、标准溶液配制：购买市售标准溶液（10pmol/μL、25pmol/μL、100pmol/μL、250pmol/μL、1000pmol/μL）。2.3 色谱条件参数值色谱柱AdvanceBio AAA C18，4.6 × 100 mm, 2.7 µm流速1.5 mL/min柱温40 °C流动相A) 10 mmol/L 磷酸氢二钠和 10 mM硼酸钠溶液，用盐酸将 pH 调节为 8.2B) 甲醇:乙腈:水，45:45:10 (v:v:v)梯度程序时间 (min) %B0.0 20.35 215.7 10015.8 218.0 2检测器338 nm，带宽 10 nm；参比 390 nm，带宽 20 nm（一级氨基酸）262 nm，带宽 16 nm；参比 324 nm，带宽 8 nm（二级氨基酸）进样程序• 吸取 2.5 μL 硼酸盐缓冲液（1号瓶）• 吸取 1.0 μL 样品• 在清洗口将3.5 μL 混合液混合 5 次• 等待 0.2 分钟，然后吸取 0.5 μL OPA（2号瓶）• 在清洗口将 4 μL 混合液混合 10 次• 吸取 0.4 μL FMOC（3号瓶）• 在清洗口将 4.4 μL 混合液混合 10 次• 吸取 32 μL 稀释剂（4号瓶，此步骤一般情况不使用）• 在清洗口将 20 μL 混合液混合 8 次• 进样• 等待 0.1 分钟• 阀切换至旁路2.4 测定方法依据保留...

土壤中铵态氮的测定方法

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发布时间： 2022 - 03 - 04

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铵态氮是自然界氮元素的一种存在形态，以铵根离子（NH4+）的形态存在和流通于土壤、植物、肥料和大气中。可以与其他形式的氮元素在一定条件下相互转化。今天栢晖给大家介绍一下如何通过2mol•L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法测定土壤中的铵态氮。方法原理2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.05～0.5mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。试剂（1）2mol•L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4•7H2O, 化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4•12H2O, 化学纯）31.8g和 52.5g•L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含5%有效氯的漂白粉溶液)10mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。（4）掩蔽剂将400g•L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O, 化学纯）与100g•L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL混合液中加入10 mol•L-1氢氧化钠0.5mL。（5）铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯]0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100ug •mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释20倍，即配制成含铵态氮（N）5ug •mL –1的标准溶液备用。分析步骤（1）浸提称取适量土样，准确到0.01g，置于150mL三角瓶中，按固液比1:5加入氯化钾溶液，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。取出静置，待土壤—氯化钾悬浊液澄清后，吸取一定量上层清液进行分析。如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备用。（2）比色吸取土壤浸出液2mL～10mL(含NH4+—N 2-25ug)放入50mL容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸钠碱性溶液5mL，摇匀。在20℃左右的室温下放置1h后（注1），加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。2h后，用1cm比色槽在625nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。（3...

植物超氧化物歧化酶的测定方法介绍（比色法）

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发布时间： 2022 - 02 - 11

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超氧化物歧化酶（SOD）是生物体系中抗氧化酶系的重要组成成员，广泛分布在微生物、植物和动物体内。其是在上个世纪末才被发现，可以说是生物医学研究史上的一项重大成果,于人类生命研究具有极其重要的意义。今天我们就给大家分享一下如何通过比色法测定植物酶活SOD。图片来源于网络一、试剂所有试剂除注明者外，均为分析纯。1.1 磷酸缓冲液：A液：0.2M的KH2PO4溶液分析纯KH2PO4 27.216克，用蒸馏水定容至1000毫升。 B液：0.2M的K2HPO4溶液分析纯K2HPO4•3H2O 45.644克，用蒸馏水定容至1000毫升。或 A液：0.2M的NaH2PO4溶液分析纯NaH2PO4•2H2O 31.21克，用蒸馏水定容至1000毫升。 B液：0.2M的Na2HPO4溶液分析纯Na2HPO4•12H2O 71.64克，用蒸馏水定容至1000毫升。1.2 母液的配制：（1）0.5M 磷酸缓冲液（PH=7.8）：A液21.25ml+B液228.25ml定容至1000ml；（2）130mM Met(甲硫氨酸)：取1.9399克Met 用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至100ml；（3）750μM四氮唑蓝（NBT）：取0.06133gNBT用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至100ml(避光保存)；（4）100μM EDTA-Na2：取0.0372g EDTA-Na2用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至1000ml；（5）20μM FD (核黄素)：0.00753gFD用磷酸缓冲液（PH=7.8）定容至1000ml（现配现用）。 1.3 SOD反应液：磷酸缓冲液（PH=7.8）：Met：NBT：EDTA-Na2：核黄素（FD）：H2O的比例为15：3：3：3：3：2.5，按母液顺序配制。二、主要仪器万分之一分析天平、紫外分光光度计、医用离心机、研钵三、试样的制备取新鲜样本剪碎充分混匀后，装入样本瓶放入4℃冷藏备用。四、分析步骤4.1 酶液的制备：称取鲜样0.5g放入研钵中，加5毫升PH=7.8的磷酸缓冲液，冰浴研磨，匀浆倒入离心管中，冷冻离心20分钟（10000×g），上清液（酶液）倒入试管中，置于0～4℃下保存待用。 4.2 SOD的测定取型号相同的试管，吸取20ul的酶液，加入3ml反应液，4000Lux照光（多用为环形日光灯的光照培养箱）30分钟（尽量做到照光情况一致）4.3 空白与对照的制备同时取四支试管，三支做对照（CK），一支做空白（不加酶液，以缓冲液代替）；空白置暗处，对照（CK）与酶液同至于4000Lux条件下照光3...

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